非洲猪瘟病毒H240R蛋白单克隆抗体的筛选与鉴定

摘要：

为制备抗非洲猪瘟病毒(ASFV)H240R蛋白单克隆抗体,首先构建原核表达质粒pET-29b-H240R,再进行蛋白表达与纯化,随后免疫Balb/c小鼠,通过杂交瘤细胞技术制备、间接ELISA方法筛选获得单克隆抗体.结果显示,共获得4株杂交瘤细胞株,腹水效价均高于1:40000;亚型鉴定结果显示,3株单克隆抗体(12D6、21G3、8G7)重链亚类为IgG2b,13D2重链亚类为IgG1,轻链亚类均为k.Western blot和Dot blot鉴定结果表明,21G3、13D2株单克隆抗体识别的抗原表位为线性表位,而12D6和8G7识别的是构象表位.间接免疫荧光试验(IFA)结果显示,4株单克隆抗体均能特异性识别HEK293T细胞中表达的H240R蛋白.制备了ASFV H240R蛋白单克隆抗体,为H240R蛋白的表位和功能研究奠定了基础.

关键词：非洲猪瘟病毒、H240R蛋白、单克隆抗体

所属期刊栏目：43

分类号：S852.651(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金31941001

在线出版日期：2022-09-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1-6