HEBP1基因敲除对牛病毒性腹泻病毒在MDBK细胞中增殖的影响

摘要：

为研究血红素结合蛋白1(HEBP1)对牛病毒性腹泻病毒(BVDV)复制的影响,应用CRISPR/Cas9技术建立HEBP1基因敲除的MDBK细胞系;用BVDV TC株感染HEBP1基因敲除的MDBK细胞,用免疫荧光染色检测BVDV双链RNA(dsRNA)水平,观察BVDV致细胞病变效应(CPE)情况,实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测BVDV 5′UTR mRNA水平,Reed-Muench测定病毒滴度变化.结果表明,成功构建HEBP1基因敲除的MDBK稳定细胞系,敲除效率为72.41％;敲除HEBP1基因显著性抑制BVDV 5′UTR mRNA和dsRNA积累,减弱BVDV感染靶细胞的CPE,降低BVDV滴度.说明敲除HEBP1基因显著性抑制BVDV的复制,为抗BVDV研究提供新的思路和药物靶点.

关键词：血红素结合蛋白1;牛病毒性腹泻病毒;CRISPR/Cas9基因编辑;病毒复制

所属期刊栏目：42

分类号：Q291

资助基金：国家自然科学基金项目;新疆维吾尔自治区自然科学基金项目;自治区青年科技创新人才培养项目;新疆农业大学畜牧学博士后流动基金项目

在线出版日期：2021-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：14-18