沙丁胺醇人工抗原的制备及ic-ELISA方法的建立

摘要：

以合成沙丁胺醇(SAL)完全抗原为基础获得针对SAL的多克隆抗体,建立检测SAL的间接竞争ELISA(ic-ELISA)检测方法,为进一步开发SAL快速检测试剂盒奠定基础.为此,分别用混合酸酐法和活化酯法制备SAL-BSA免疫原和SAL-OVA检测原,免疫新西兰大白兔获得SAL多抗血清,建立检测SAL ic-ELISA检测方法.结果显示,成功合成了 SAL-BSA和SAL-OVA,其偶联比分别为17 ∶ 1和6.4 ∶ 1;免疫后兔血清抗体效价为1 ∶ 102 400,所建立ic-ELISA的半数抑制浓度(IC50)为24.84 μg/L,最低检测限(IC10)为0.78 μg/L,线性范围IC20～IC80为 3.16μg/L～80.1 μg/L;精密度(CV)％＜10％,回收率在98％～110％之间.特异性鉴定结果显示,SAL多抗血清除与侧链上含有叔丁基官能团的结构类似物具有较强的交叉反应外,不存在与其他同类分子的交叉反应.以上结果表明,成功建立了检测SAL的ic-ELISA检测方法,为进一步开发SAL快速检测试剂盒奠定了基础.

关键词：沙丁胺醇、人工抗原、多克隆抗体、间接竞争ELISA

所属期刊栏目：42

分类号：S852.4;S851.34(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划;河南省科技攻关计划;河南省高等学校重点科研项目;新乡学院博士科研启动经费

在线出版日期：2021-06-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：42-49