猪A群轮状病毒荧光定量PCR检测方法的建立及应用

摘要：

根据近5年来GenBank发布的猪A群轮状病毒(RVA)VP6基因序列,针对保守区域设计1对特异性引物,优化反应体系及条件,建立了TB Green实时荧光定量PCR方法.该方法在模板浓度为1.06×108 copies/μL～1.06×102 copies/μL范围内线性关系良好,相关系数R2 =0.997 5,最低检出浓度为106 copies/μL;批内及批间变异系数小于2％.利用该方法对猪RVA亚型G3、G4、G5、G9和G26检测均为阳性,而对猪常见病原(猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪流行性腹泻病毒、猪呼肠孤病毒MRV、猪捷申病毒、巴氏杆菌、链球菌以及猪等孢球虫)检测均为阴性.对91份临床腹泻样品进行检测,研究建立的猪RVA TB Green实时荧光定量PCR检出率(43.96％,40/91)高于已报道的猪RVA SYBR Green荧光定量PCR(42.86％,39/91)和国家标准RVA的普通RT-PCR(12.09％,11/91),且符合率为100％.建立的RVA荧光定量PCR检测方法为流行病学调查和早期诊断提供了技术支撑.

关键词：猪轮状病毒、荧光定量PCR、VP6基因

所属期刊栏目：42

分类号：S852.659.4;S858.28(动物医学（兽医学）)

在线出版日期：2021-04-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：41-45