鸡毒支原体和鸡滑液囊支原体双重PCR检测方法的建立

摘要：

为建立一种能同时检测鸡毒支原体和鸡滑液囊支原体的双重PCR方法,根据MG gapA基因和MS vlhA基因设计合成特异性引物,通过对双重PCR扩增条件的优化,建立能够同时检测MG和MS的双重PCR方法.结果显示,双重PCR反应条件中最适退火温度为58℃,反应体系中最适模板浓度为5.76 ng/μL,最适引物量为1.25μL(10 mmol/L).特异性试验显示,所建PCR方法对MG、MS、MG/MS混合培养物均可扩增出相应的特异性条带,而对AIV疫苗、NDV疫苗、MO、E.coli、SE的基因组扩增结果均为阴性;敏感性试验显示,该方法对MS、MG最低检出核酸终浓度分别为0.045 ng/μL和0.09 ng/μL;临床应用性试验显示,所建立的双重PCR方法可同时有效地检测出MG和MS核酸.结果表明,该双重PCR具有良好的特异性、敏感性、临床应用性,可以用于临床病料中MG和MS的快速检测,为MG和MS感染的诊断和流行病学监测提供了一种简便适用的方法.

关键词：鸡毒支原体、滑液囊支原体、双重PCR、检测

所属期刊栏目：41

分类号：S852.62(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金项目;贵州省研究生工作站项目

在线出版日期：2020-07-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：27-31