伪狂犬病病毒gE/gI基因在昆虫细胞中的表达及鉴定

摘要：

为获得具有生物活性的伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)gE/gI蛋白,建立PRV抗体快速检测方法.将含有PRV gE、gI基因的质粒pFastBacdual-GP67-gE/gI转化至宿主菌,经位点特异性重组和蓝白斑筛选后获得重组杆粒rBacmid-gE/gI,转染Sf9细胞,获得重组杆状病毒.采用悬浮的Sf9细胞进行发酵并纯化产物,SDS-PAGE和Western blot分析镍柱纯化后的重组蛋白.结果显示,重组杆粒在4800 bp处克隆出预期大小的条带,表示重组杆粒构建成功.SDS-PAGE和Western blot表明,在50 ku和65 ku处出现预期大小的条带,能与PRV标准阳性血清特异性反应,不与PRV gE/gI缺失疫苗免疫血清反应.结果表明gE/gI重组蛋白具有良好的反应原性,为PRV抗体快速检测及区分PRV野毒感染和疫苗免疫奠定了基础.

关键词：伪狂犬病病毒、gE/gI基因、杆状病毒系统表达

所属期刊栏目：41

分类号：S852.659.1(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划项目2016YFD0500702

在线出版日期：2020-04-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：25-29