毛皮动物源大肠埃希菌毒力基因二重PCR检测方法的建立

摘要：

为了建立一种能够快速检测毛皮动物源大肠埃希菌耶尔森菌强毒力岛(HPI)中irp2、FyuA毒力基因的二重PCR方法,根据GenBank中irp2、FyuA基因的序列,设计并合成两对引物,扩增得到irp2、FyuA基因片段,大小分别为300 bp和951 bp.据此建立双重PCR方法,并将反应条件进行了优化.结果 表明,用所建立的二重PCR方法可同时特异性扩增出大肠埃希菌irp2、FyuA毒力基因片段,对沙门菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、克雷伯菌均无特异性扩增.菌液最低检出量为2.8×105 CFU/mL.在78份临床样品检测中,二重PCR检测结果与常规PCR检测结果一致.所建立的大肠埃希菌irp2、FyuA毒力基因二重PCR检测方法具有很好的特异性和灵敏度,能够提高临床样品检测的效率.

关键词：毛皮动物、大肠埃希菌、毒力基因、二重PCR检测方法

所属期刊栏目：40

分类号：S852.612(动物医学（兽医学）)

资助基金：河北省现代农业产业体系肉牛产业创新团队疫病防控项目HBCT2018130203;河北省教育厅基金项目SL-RC2017037;河北省高层次人才资助项目A2016005046;河北科技师范学院科学研究基金

在线出版日期：2019-07-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：12-16