绵羊肺炎支原体环介导等温扩增联合横向流动 试纸条可视化检测方法的建立

摘要：

为建立绵羊肺炎支原体快速检测方法,用环介导等温扩增(LAMP)技术进行核酸扩增,通过横向流动试纸条(LFD)实现可视化检测.针对绵羊肺炎支原体HSP 70基因设计一套特异性引物,其中HSP 70 FIP由生物素标记进行LAMP扩增反应,产物与生物素标记的探针杂交后,在LFD上完成检测,建立了绵羊肺炎支原体LAMP-LFD快速检测方法,并对其特异性、敏感性及临床应用进行检测.结果表明,LAMP在62℃反应70 min,即可特异性的检测绵羊肺炎支原体的存在,最低检测线为1.0×102 CFU/mL,灵敏度是常规PCR检测方法的100倍,且对已知感染绵羊肺炎支原体的羊病变肺组织临床样品的检出率为100％.建立的LAMP-LFD检测绵羊肺炎支原体的方法特异性强、灵敏度高并且操作简便,为羊感染绵羊肺炎支原体的预防和诊断提供了新方法.

关键词：绵羊肺炎支原体、HSP70基因、环介导等温扩增技术、横向流动试纸条、检测

所属期刊栏目：40

分类号：S852.62(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金项目31360226

在线出版日期：2019-05-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1-8