鸡柔嫩艾美耳球虫和巨型艾美耳球虫双重PCR检测方法的建立

摘要：

为了建立一种能够快速实现对鸡柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)和巨型艾美耳球虫(E.maxima)同时进行检测的双重PCR方法,基于2种艾美耳球虫各自的ITS-1基因筛选2对特异性引物,对制备的阳性DNA样品进行PCR扩增,凝胶电泳检测结果显示,分别在约450 bp和150 bp处出现目的条带.对PCR反应中的退火温度、MgCl2浓度、DNA模板量等进行优化.结果 表明,当退火温度为59℃、MgCl2浓度为2.5 mmol/L、DNA模板量为2μL时,双重PCR扩增结果最佳.特异性检测结果显示,所建立的双重PCR对环形泰勒虫、羊巴贝斯虫、隐孢子虫和蓝氏贾第虫的扩增结果均呈阴性,表明建立的方法具有较高的特异性.成功建立了柔嫩艾美耳球虫和巨型艾美耳球虫双重PCR检测方法,为临床中鸡球虫病的快速诊断提供了一种可靠的检测方法.

关键词：鸡、柔嫩艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫、双重PCR

所属期刊栏目：40

分类号：S852.723;S854.43(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划项目2017YFD0501200

在线出版日期：2019-05-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：17-21