牛病毒性腹泻病毒E1蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备

摘要：

利用原核表达系统表达牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的E1蛋白,以制备抗E1多克隆抗体.根据E1蛋白的编码序列,设计一对特异性引物,利用PCR扩增BVDV E1片段,定向插入pPROEX-HTb载体中,转化大肠埃希菌BL21感受态细胞,筛选获得阳性重组菌,以IPTG进行诱导表达、金属离子层析法纯化获得分子质量为23 ku的重组E1蛋白.利用纯化的E1重组蛋白经3次免疫新西兰白兔后收获多克隆抗体,间接ELISA检测多克隆抗体效价达到1:12800以上.间接免疫荧光试验证实多克隆抗体可与细胞中的BVDV抗原发生反应,具有良好的反应性和特异性.成功制备了BVDV重组E1蛋白的兔源多克隆抗体,为BVDV的检测和E1蛋白功能的研究奠定了基础.

关键词：牛病毒性腹泻病毒、E1蛋白、表达、多克隆抗体

所属期刊栏目：39

分类号：S852.653(动物医学（兽医学）)

资助基金：牛重要病毒病多价多联疫苗及防控技术研究2017YFD0500904;农业科技创新工程2014ZL010

在线出版日期：2018-12-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：30-34