猪繁殖与呼吸综合征病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用

摘要：

为建立猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的一种特异、灵敏、量化且耗时短的检测方法,通过设计1对PRRSV ORF7基因的引物,建立Eva Green染料的实时荧光定量PCR(real-time PCR)的检测方法,对该方法的特异性、灵敏性和重复性进行检验,并检测PRRSV疑似感染的临床病料.结果显示,所建立的real-time PCR检测方法标准曲线的线性相关系数R2=0.999,具有良好的线性关系;与传染性胃肠炎病毒(PEDV)、猪瘟病毒(CSFV)、伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)无交叉反应,特异性强;与常规RT-PCR检测方法相比,灵敏度提高100倍;重复试验表明变异系数系数在1％以下,重复性良好.对27份临床样品进行检测,结果比常规PCR多检出3份阳性.说明建立的real-time PCR检测方法在特异性、灵敏度、重复性方面均相比良好,可用于临床PRRSV的检测.

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒、实时荧光定量PCR、检测

所属期刊栏目：39

分类号：S852.659.6(动物医学（兽医学）)

资助基金：西安市农业科技创新计划研发类2017050NC/NY010-2;杨凌示范区农业科技示范推广能力提升项目TS-2016-12;杨凌示范区农业科技计划项目2018NY-10

在线出版日期：2018-10-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：25-29