口蹄疫病毒O型OHM/02株全长cDNA感染性克隆的构建

摘要：

为构建O型口蹄疫病毒(FMDV)的感染性克隆,采用 RT-PCR将 O型 FMDV OHM/02株全长基因组分为5个重叠的片段进行扩增,克隆至载体 pUC57中,获得全长 cDNA克隆 pPO-1.将线性化的pPO-1与含有编码 T7 RNA 聚合酶的真核表达重组质粒共转染 BHK-21细胞,出现致细胞病变效应(CPE).对拯救的病毒进行RT-PCR扩增、酶切、测序,表明人工设计的分子标记B am HⅠ酶切位点消失,排除了亲本毒株污染的可能性.间接免疫荧光试验可以检测到绿色荧光,电镜观察可观察到病毒粒子,表明构建了具有感染性的 OHM/02毒株全长 cDNA克隆.病毒生长曲线表明,拯救病毒与亲本病毒的复制能力和增殖特性相似.OHM/02株全长 cDNA感染性克隆的构建及拯救可为FMDV致病机理的研究提供一种重要工具,可促进疫苗的研发.

关键词：口蹄疫病毒、全长cDNA、转染、病毒拯救

所属期刊栏目：39

分类号：S852.659.6(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家科技支撑计划项目2013BAD12B04;新疆维吾尔自治区科研机构创新发展专项资金项目2016D04008;新疆维吾尔自治区公益性科研院所基本科研业务经费项目2014,2015

在线出版日期：2018-02-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1-6