牛IgG Fc片段与FnBPB-ClfA串联表达及其对金黄色葡萄菌性奶牛乳腺炎的免疫效果

摘要：

为了提高金黄色葡萄球菌(S.aureus)黏附素FnBPB-ClfA基因表达蛋白对奶牛的免疫效力,应用RT-PCR扩增奶牛IgG Fc基因片段与构建的金黄色葡萄球菌(S.aureus)FnBPB-ClfA黏附素基因串联构建质粒pMD19T-Fc-FnBPB-ClfA,并通过双酶切将其克隆于pET32a(+),以构建质粒pET32a-Fc-FnB-PB-ClfA并进行诱导表达.以盐酸左旋咪唑(LH)或氢氧化铝(ALUM)为佐剂,与纯化的重组蛋白(bFc-FnBPB-ClfA)混合以首次免疫肌肉注射,加强免疫乳头管灌注或首次免疫、二次免疫及三次免疫均以肌肉注射方式免疫临近干奶期的奶牛.用间接ELISA和Western blot对各组牛血清中的抗体进行监测,评价免疫效果.结果显示,以LH为佐剂免疫的(A组)牛21 d时抗体水平最高,可达到1∶1 600;而以ALUM为佐剂免疫的B组和C组抗体水平分别为1∶800和1∶400.IgG水平动态监测结果表明,以LH为佐剂免疫牛的血清中特异性抗体上升趋势明显高于其他免疫组.研究结果表明,以首次免疫肌肉注射,加强免疫乳头管灌注的方式较好,并且bFc-FnBPB-ClfA与LH佐剂混合后免疫奶牛能最有效激发奶牛免疫反应.

关键词：金黄色葡萄球菌、奶牛IgG Fc、重组蛋白Fc-FnBPB-ClfA

所属期刊栏目：38

分类号：S857.26;S852.611(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金项目31460664;农牧交错区生态型现代奶业生产模式研究与示范项目2012BAD12B09-02

在线出版日期：2018-01-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：27-32