羊传染性脓疱病毒CEV112基因的克隆与原核表达

摘要：

为了克隆羊传染性脓疱病毒CEV112基因并对其进行原核表达,根据GenBank中CEV112基因序列信息设计1对引物,以CEV基因组为模板,采用PCR扩增出1条大小为867 bp的CEV112基因,将其连接到pMD20-T载体上,构建pMD20-T-CEV112重组质粒,转化到大肠埃希菌(E.coli)DH5α感受态细胞中,提取质粒进行酶切鉴定.鉴定正确后构建重组质粒pET28a-CEV112,转化到E.coli BL21(DE3)感受态细胞中.经IPTG诱导表达,表达产物用SDS-PAGE和Western blot进行分析.结果表明,成功构建了pET-28a-CEV112原核表达载体,并在E.coli BL21(DE3)中表达了CEV112基因,表达的融合蛋白大小约36 ku,且主要以包涵体形式存在,为后续开展CEV112基因的功能研究奠定了基础.

关键词：羊传染性脓疱病毒、CEV112基因、克隆、原核表达

所属期刊栏目：38

分类号：S852.659.1;Q789(动物医学（兽医学）)

资助基金：海南省重大科技计划项目ZDKJ2016017-01

在线出版日期：2017-04-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：68-72