大肠埃希菌ETT2毒力岛ECs3703基因和HPI毒力岛irp2基因双重LAMP检测方法的建立

摘要：

根据GenBank中大肠埃希菌ETT2毒力岛保守基因ECs3703和HPI毒力岛的保守基因irp2分别设计一套LAMP引物,在同一体系中进行LAMP扩增,通过对体系Mg2+、dNTP、内引物及反应温度和反应时间等进行优化,建立了在60℃恒温下对大肠埃希菌ETT2和HPI毒力岛进行同步检测的LAMP方法,并进行了特异性和灵敏性试验.结果显示,所建立的双重LAMP检测方法同时检测ETT2和HPI毒力岛大肠埃希菌检测限均可达到100 fg,比常规PCR灵敏度高100倍.利用该方法对8株非大肠埃希菌进行LAMP扩增,结果均为阴性.用该方法对采集的20份临床样品进行检测,与双重PCR检测结果一致.结果显示,该双重LAMP方法可用于大肠埃希菌ETT2和HPI毒力岛的同步快速检测,可作为临床疫病诊断的有效手段.

关键词：大肠埃希菌、ETT2毒力岛、HPI毒力岛、双重LAMP

所属期刊栏目：38

分类号：S852.612(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金项目31440083;江苏省高等学校大学生创新创业训练计划项目--校企合作基金项目201512806029H

在线出版日期：2017-04-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

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