高致病性PRRSV JL-04／12株核衣壳蛋白的表达与抗原性分析

摘要：

为获得高浓度、高质量的有效原核表达蛋白作为 ELISA诊断抗原，通过 RT-PCR法扩增猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）JL-04／12株的核衣壳蛋白（N蛋白）基因并克隆到原核表达载体 pGEX-6P-1中，转入到大肠埃希菌BL-21感受态细胞，经IPTG诱导表达，通过温度和IPTG浓度的优化，进行重组蛋白的高效表达，经SDS-PAGE和 Western blot对表达产物的特性进行分析，利用 GST柱纯化表达蛋白，并免疫小鼠，ELISA检测其刺激产生抗体的能力-抗原的免疫原性。结果表明，0．1 mmol／L的 IPTG、28℃诱导4 h可高效诱导重组蛋白的表达，在表达上清中目的蛋白达40％，原核表达的重组N蛋白可诱导小鼠产生抗体，抗体效价为1∶256。原核表达的N蛋白与PRRSV具有相同的抗原性。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒、核衣壳蛋白、原核表达、纯化

分类号：S852.659.6(动物医学（兽医学）)

资助基金：吉林省科技发展计划项目20121823；国家“十二五”高技术研究发展计划项目2011AA10A213

在线出版日期：2015-10-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：60-63,64