B型产气荚膜梭菌C58-1株ε毒素基因序列分析与可溶性表达

摘要：

利用PCR技术从B型产气荚膜梭菌扩增出ε毒素基因,然后用限制性核酸内切酶BamH Ⅰ和Sal Ⅰ对其进行酶切,回收984 bp的ε毒素基因片段,将其定向克隆在载体PET-32a中,获得重组质粒pETε984.将pETε984转化至受体菌BL21 (DE3)中.重组菌株经IPTG诱导后,其表达产物经SDS-PACE分析.结果表明,重组目的蛋白在大肠埃希菌成功表达,融合蛋白大小为51 ku,存在于细菌培养上清中,可溶性蛋白占菌体总蛋白相对含量的67.8％.序列分析表明C58-1株e毒素蛋白序列与目前公布的所有B型和D型产气荚膜梭菌同源性均在99.7％以上,但ε毒素蛋白序列第321位出现了S→Y突变.研究结果为ε毒素蛋白的亚单位疫苗研究奠定了基础.

关键词：产气荚膜梭菌B型C58-1株、ε毒素基因、表达、序列分析

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分类号：S852.616.3(动物医学（兽医学）)

资助基金：山东省现代农业产业技术体系羊产业创新团队项目SATS-201226-3

在线出版日期：2015-07-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：29-32