结核分支杆菌Rv3117基因的克隆与原核表达

摘要：

以结核分支杆菌H37Rv株染色体DNA为模板,应用Rv3117基因特异性引物对该基因进行PCR扩增,获得约800 bp的DNA片段.将PCR纯化产物克隆至pMD-18T Vector中,构建出重组质粒pMD-18T-Rv3117.以EcoR Ⅰ和SamⅠ双酶切pMD-18T-Rv3117重组载体和pGEX-4T-1原核表达载体,并将纯化的Rv3117基因亚克隆至pGEX-4T-1中,构建出原核重组表达质粒pGEX-4T-1-Rv3117.将pGEX-4T-1-Rv3117重组质粒转化至感受态E.coli BL21中,经IPTG诱导和SDS-PAGE分析,可见约30ku目的蛋白带.Western blot分析结果显示,该蛋白能与抗结核分支杆菌阳性血清发生特异性反应.研究结果为结核病临床诊断抗原的筛选奠定了基础.

关键词：结核分支杆菌、Rv3117基因、克隆、原核表达

所属期刊栏目：36

分类号：S852.618(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家科技支撑计划项目2011BAI03B02-1;国家自然科学基金项目31072140;吉林省科技厅科技支撑计划项目20120225;吉林省科技厅科技成果转化促进计划项目20125067

在线出版日期：2015-07-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：15-18