10.3969/j.issn.1007-5038.2014.10.002
一株口蹄疫病毒非结构蛋白3A 单克隆抗体的表位肽段鉴定
为鉴定口蹄疫病毒非结构蛋白3A 的单克隆抗体3A24#识别的表位区,对非结构蛋白3A 分两个肽段进行原核表达,其中3A1和3A2肽段分别包含3A 蛋白的第1位~89位和77位~153位氨基酸。分别针对两肽段基因设计并合成引物,PCR 扩增后定向克隆到原核表达载体 pET-30a(+)-PES-SUMO,将重组质粒转化宿主菌 E.coli BL21(DE3)pLys,IPTG 诱导表达。用单克隆抗体3A24#对表达的3A1和3A2肽段进行 Western blot 检测,以鉴定单克隆抗体3A24#的识别表位肽。SDS-PAGE 分析表明,成功表达了3A1和3A2肽段,大小分别为26 ku 和25 ku。Western blot 分析表明,FMDV 牛阳性血清与两肽段均能识别,而单克隆抗体3A24#只能与3A2肽段发生反应,与3A1肽段不发生反应。3A24#单克隆抗体识别的抗原表位位于3A2肽段,即3A 蛋白的第89aa~第153aa 肽段上。
口蹄疫病毒、单克隆抗体、抗原表位
S852.659.6(动物医学(兽医学))
甘肃农业大学伏羲杰出人才项目;“十二五”国家高技术研究发展计划863计划项目2012AA101304
2014-10-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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