10.3969/j.issn.1007-5038.2014.07.009
罗非鱼hepcidin 1-5成熟肽在毕赤酵母中的表达和活性研究
为获得重组酵母分泌表达的莫桑比克罗非鱼hepcidin并进行其功能研究,将罗非鱼hepcidin 1-5(TH1-5)成熟肽cDNA插入表达载体pPIC9K,获得重组分泌表达质粒pPIC9K-TH1-5,电转化毕赤酵母GS115,阳性克隆经甲醇诱导获得表达上清;表达上清冻干品经Dot-ELISA检测,并分析了表达产物对指示菌和鸡外周血淋巴细胞的影响.结果表明,TH1-5成熟肽可通过表达质粒pPIC9K在毕赤酵母中实现分泌型表达,Dot-ELISA检测表达上清中含有TH1-5.重组表达的TH1-5对大肠埃希菌(CMCC44102)、金黄色葡萄球菌(ATCC25923)、铜绿假单胞菌(ATCC27853)、粪肠球菌(ATCC29212)具有明显的抑菌活性;含重组表达TH1-5的上清冻干品(6.25 mg/mL)可协同ConA(0.125 μg/mL)或LPS(0.125 μg/mL)促进鸡外周血淋巴细胞的增殖.
罗非鱼hepcidin、酵母表达、斑点-酶联免疫吸附试验、抑菌活性、淋巴细胞增殖
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R979.5(药品)
国家自然科学基金项目30800811;国家重点基础研究发展计划项目2014CB138600;安徽农业大学引进与稳定人才基金项目yj2006-13
2014-09-03(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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