新城疫病毒LaSota株NP、P和L基因表达载体的构建及真核表达

摘要：

为研究新城疫病毒NP、P和L蛋白作用机理和新城疫病毒反向遗传操作系统，构建新城疫病毒LaSota株NP、P和L基因的真核表达载体。根据GenBank中新城疫LaSota株的全长序列（JF950510．1），设计4对特异性引物，用RT-PCR法扩增出新城疫病毒LaSota株的NP、P和L基因，将其克隆到真核载体pCl-neo上。通过酶切和测序验证克隆正确，得到重组质粒pCl-NP、pCl-P和pCl-L，瞬时转染到BHK-21细胞中。经RT-PCR、Westernblot、间接免疫荧光试验分别检测NP、P和L蛋白在BHK-21细胞中的表达。经上述三种方法分别检测到NP、P和L蛋白在BHK-21细胞中的表达。重组质粒pCl-NP、pCl-P和pCl-L构建成功，为后期新城疫病毒反向遗传操作系统的构建奠定了基础。

关键词：新城疫病毒、NP、P和L基因、辅助质粒

分类号：S852.659(动物医学（兽医学）)

资助基金：湖北省自然科学基金项目2010CDB10101；湖北省农业创新岗位基金

在线出版日期：2014-07-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

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