柔嫩艾美耳球虫长春株 SAG2基因的克隆与序列分析

摘要：

根据已发表的柔嫩艾美耳球虫（Houghton 株）基因序列，设计一对特异性引物，通过 RT-PCR扩增柔嫩艾美耳球虫长春株 SAG2基因，将扩增的片段连入 pMD18T 载体，筛选阳性克隆进行测序和序列分析。结果表明，成功克隆了柔嫩艾美耳球虫长春株 SAG2基因，测得 ORF 全长813 bp；与 GenBank 中收录的 Houghton 株柔嫩艾美耳球虫的 SAG2基因序列相比，有4个碱基发生变异，两者的核苷酸序列同源性为99．50％；柔嫩艾美耳球虫长春株 SAG2基因的推导氨基酸序列同源性为99．63％，其中，A185G 变异导致了编码氨基酸由谷氨酸变为甘氨酸（E62G），A247T 变异导致了编码氨基酸由蛋氨酸变为亮氨酸（M83L），而其他核苷酸的突变为无义突变；SAG2抗原的 N 端和 C 端疏水性较强，并且 N 端前23个氨基酸为跨膜信号肽区，而中间有许多亲水性区域，且显示很强的抗原性。柔嫩艾美耳球虫长春株与 Houghton 株的 SAG2基因编码蛋白相似性很高，具有很强的抗原性，可以作为球虫疫苗的候选抗原来进一步研究。

关键词：柔嫩艾美耳球虫长春株、SAG2 基因、克隆、序列分析

分类号：S852.723(动物医学（兽医学）)

资助基金：吉林省科技发展计划项目201205071；辽宁省丹东市科学技术计划项目08107

在线出版日期：2014-01-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：115-119,120