miRNA-34c实时荧光定量PCR检测方法的建立

摘要：

为建立稳定有效检测miR-34c的实时荧光定量技术体系，采用茎环结构法设计了反转录引物，并通过梯度浓度及梯度温度PCR法对miR-34c的最佳退火延伸温度和模板浓度进行了确定，最后通过实时荧光定量 PCR对miR-34c进行检测。试验成功建立了精确检测miR-34c的实时荧光定量技术体系，其中miR-34c最佳退火延伸温度为62．4℃及每个实时定量反应体系中 cDN A 对应的 RN A 量最适浓度为50 ng/μL ，并得到重复性高、特异性强的检测结果。该技术体系的建立不仅为检测miR-34c提供了精准便捷的方法，而且可为设计检测其他miRN A提供技术支持。

关键词：实时荧光定量PCR、miRNA-34c、颈环、退火温度、模板浓度

分类号：S852.2(动物医学（兽医学）)

资助基金：西北农林科技大学人才引进专项基金Z111021101；国家高技术研究发展计划863计划2011AA10A208

在线出版日期：2013-12-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：11-15