猪瘟病毒E2蛋白抗原表位集中区的原核表达及鉴定

摘要：

为获得猪瘟病毒(CSFV)E2蛋白抗原表位集中区原核重组目的蛋白,建立CSFV抗原和抗体快速检测方法.通过扩增CSFV E2蛋白抗原表位集中区基因,亚克隆至表达载pET-30a(+),构建重组原核表达载体pET-30a-E2-1,转化至宿主菌Rostta(DE3)后进行诱导表达.SDS-PAGE分析显示,出现与目的蛋白大小一致的蛋白条带,分子质量大小为31 ku.对重组蛋白表达条件进行优化,最终获得其诱导表达的最佳温度为18℃,最佳IPTG浓度为0.1 mmol/L.目的蛋白以包涵体形式存在,其表达量约占菌体总蛋白含量的46％.Western blot分析显示,目的蛋白不仅能与兔抗CSFV高免血清反应,还可以与载体特异性标签His单抗反应,表明融合蛋白具有良好的抗原性,为CSFV抗原和抗体检测试剂盒的研制奠定了基础.

关键词：猪瘟病毒、E2蛋白、抗原表位、原核表达、鉴定

所属期刊栏目：34

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：河南省基础与前沿技术研究122300410003;河南省自然科学基金项目330002,122300410003;国家自然科学基金31201877;新乡学院博士科研启动经费1399020164;河南科技学院研究生创新基金

在线出版日期：2013-05-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：15-20