猪瘟病毒和不同型猪繁殖与呼吸综合征病毒的多重RT-PCR检测方法的建立

摘要：

为建立能同时检测猪瘟病毒(CSFV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的方法,针对CSFV和PRRSV的基因序列设计3对特异性引物,第1对引物扩增CSFV毒株NS2基因508 bp片段,第2对引物扩增PRRSV美洲型经典毒株和变异毒株Nsp2基因338 bp/248 bp片段,第3对引物扩增PRRSV欧洲型毒株ORF5基因614 bp片段.经过反应条件的优化,建立了能同时检测并区分CSFV毒株和PRRSV美洲型经典毒株、变异毒株及欧洲型毒株的多重RT-PCR方法.该方法可以特异扩增CSFV和PRRSV,而与猪口蹄疫病毒(FMDV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)均无交叉反应；对CSFV和PRRSV 4种重组质粒标准品的检出下限均为1.67×103拷贝/μL.对采集的106份临床疑似病料进行检测,结果CSFV和PRRSV变异株混合阳性4份,占3.77 ％(4/106);CSFV阳性7份,占6.60％(7/106)；PRRSV变异株阳性17份,占16.04 ％(17/106).结果表明,建立的多重RT-PCR检测方法可以用于CSFV和PRRSV的临床快速鉴别诊断和流行病学调查.

关键词：猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、美洲型毒株、欧洲型毒株、多重反转录-聚合酶链反应

所属期刊栏目：33

分类号：S854.44(动物医学（兽医学）)

资助基金：广西科学基金项目桂科青0832057

在线出版日期：2012-11-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：9-15