丁型肝炎病毒ORF5基因片段的原核表达及在ELISA中的初步应用

摘要：

为获得HDAg抗原,以含有ORF5编码区基因的pETHD质粒为模板进行PCR扩增得到500bp大小片段,经过BamH Ⅰ、HindⅢ双酶切,与载体pET-30a连接,构建重组表达质粒pET-30a/HDAg,再转入细胞BL21( DE3),经过IPTG诱导表达和SDS-PAGE分析,表达蛋白分子质量约27 ku,经过Ni-NTA亲和层析纯化后,纯度达95％以上.将纯化的蛋白经HRP标记,初步建立ELISA捕获法,通过对24份标本检测和交叉反应试验,结果表明表达的抗原具有很好的反应原性和特异性,为建立丁型肝炎早期检测试剂盒提供材料.

关键词：丁型肝炎病毒、丁肝抗原、原核表达、ELISA

所属期刊栏目：33

分类号：S852.659.1(动物医学（兽医学）)

资助基金：河南省科技创新团队和郑州市科技创新团队项目

在线出版日期：2012-08-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：31-34