猪源牛病毒性腹泻病毒SD0803株E2蛋白的表达及抗体制备

摘要：

表达去除SD0803 E2基因跨膜疏水区的sE2蛋白并制备其抗体,为猪源BVDV诊断奠定基础.RT-PCR扩增SD0803株sE2基因,构建重组原核表达载体pGEX-4T-1-sE2,转化BL21(DE3),IPTG诱导蛋白表达,以纯化的重组蛋白为抗原免疫家兔制备多克隆抗体.采用间接ELISA、Western blot、间接免疫荧光等方法鉴定获得的抗体.结果显示,抗体效价最高可达1∶256 000;制备的抗体可与rsE2蛋白特异性结合；该抗体可特异性识别BVDV感染MDBK细胞表达的E2蛋白,显示抗体高度的特异性.成功构建pGEX-4T-1-sE2原核表达质粒,诱导其表达的蛋白免疫家兔,成功制备的猪源BVDV SD0803株E2抗体.

关键词：牛病毒性腹泻病毒、E2蛋白、抗体制备

所属期刊栏目：33

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目2010JB15;上海市技术标准专项项目10DZ0503600

在线出版日期：2012-07-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：31-35