基于GapC基因链球菌DNA疫苗构建及其免疫效果

摘要：

应用PCR方法扩增出链球菌GapC基因后,克隆至真核表达载体pcDNA3.1中,经PCR和双酶切鉴定后,将重组质粒pcDNA3.1-GapC转染Vero细胞,观察目的基因表达情况,并免疫小鼠检测其血清抗体水平和攻毒保护效果,结果重组质粒pcDNA3.1-GapC经PCR和双酶切后,均可得到与预期大小(1011 bp和5 500 bp)一致的DNA片段,测序显示该片段确为链球菌GapC基因;转染Vero细胞后,荧光抗体试验观察,证实重组质粒pcDNA3.1-GapC得到有效的表达;免疫接种小鼠后,14 d即可检测到抗GapC蛋白抗体,35 d时抗体水平达到峰值,之后逐渐下降但维持较高的抗体水平,与对照组差异极显著(P<0.01);链球菌2型培养物攻击后,免疫组小鼠呈现的临床症状轻且恢复快、病变仅局限在肝脏和肾脏上,脾脏带菌量为3.05 lg,与对照组小鼠存在显著差异(P<0.05).结果表明,成功构建了基于GapC基因的链球菌DNA疫苗,该疫苗可诱导小鼠产生高水平的血清抗体,并能减轻链球菌感染对小鼠的危害作用,具有较好的保护效果.

关键词：链球菌、GapC基因、DNA疫苗、构建、免疫效果

所属期刊栏目：32

分类号：S852.43(动物医学（兽医学）)

资助基金：贵州农业攻关项目黔科合NY字[2009]3069号

在线出版日期：2011-09-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：32-35