微小牛蜱Bm91基因的原核表达

摘要：

根据GenBank收录的微小牛蜱Bm91基因序列设计一对表达引物,以微小牛蜱幼蜱总RNA反转录合成的cDNA为模板,扩增获得了Bm91基因,其长度为1908 bp,包含一个大小为1 833 bp的完整开放阅读框,编码611个氨基酸,该蛋白预期分子质量为83 ku.将Bm91基因片段亚克隆到原核表达载体pET-30a,构建重组原核表达载体pET-30a-Bm91,转化BL21宿主菌,经IPTG诱导,发现在0.8 mmol/LIPTG,诱导时间2 h,温度37℃条件下,目的重组蛋白表达量最大,约占蛋白总量的20%.SDS-PAGE检测表明,表达产物为分子质量为83 ku的融合蛋白,与预期大小一致;Western blot分析表明,表达产物能被兔抗微小牛蜱阳性血清所识别.

关键词：微小牛蜱、Bm91基因、原核表达

所属期刊栏目：31

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家支撑计划项目2007BAD40B06;国家863项目2006AA10A207;国家自然资源平台项目2005DKA21100

在线出版日期：2011-03-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：6-9