猪MyD88基因的原核表达

摘要：

采用PCR方法从pGEM-pMyD88重组质粒中克隆了猪MyD88分子全长基因,构建了无信号肽序列的原核表达载体pET-30a-pMyD88-ED,在不同IPTG浓度和时间下进行诱导表达,利用切胶洗脱法纯化表达的融合蛋白.结果表明,在IPTG诱导浓度为0.05 mmol/L,诱导时间为6 h时表达量达到最大,SDS-PAGE分析表明表达出约35 ku的融合蛋白,主要以包涵体的形式存在;通过切胶纯化后,融合蛋白的纯度可达90%;Western blot分析显示,表达的融合蛋白能被抗His标签的单克隆抗体识别,说明目的蛋白在大肠埃希菌中得到了成功表达.

关键词：猪MyD88分子、原核表达、大肠埃希菌

所属期刊栏目：31

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金项目308718840;国家高新技术研究发展计划863项目2006AA10A203

在线出版日期：2011-03-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1-5