猪伪狂犬病病毒gE抗体胶体金免疫层析检测方法的建立及应用

摘要：

以纯化的抗人红细胞单链抗体(ScFv)-猪伪狂犬病病毒(PRV)gE蛋白双功能融合蛋白为诊断抗原和胶体金标记物,以羊抗猪IgG包被硝酸纤维膜作为质控带,制作检测猪伪狂犬病毒gE抗体的双抗原胶体金试纸条.利用方阵滴定试验筛选出金标抗原最佳工作浓度为17.6 μg,检测线诊断抗原最佳标记量为1.76 μg,血清最佳稀释度为1∶10,作用时间15 min,与猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪乙型脑炎病毒(JEV)、猪布鲁菌(Brucella)阳性血清和PRVgE缺失疫苗接种的猪免疫血清检测线均不出现红色条带,与PRV标准阳性血清反应检测线出现红色条带.试纸条操作简单,肉眼于15 min内可判定结果;试纸条在室温保存6个月,其特异性和敏感性没有明显变化;与美国IDEXX和法国LSI gE-ELISA抗体检测诊断试剂盒检测结果比较,1 164份猪血清的符合率均为90.55%.制备的胶体金试纸条具有操作简便、敏感性和特异性较高的特点,可用于PRV野毒感染的快速筛查.

关键词：伪狂犬病毒、金标免疫层析法、gE基因、抗体检测

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分类号：S858.28;S852.659.1(动物医学（兽医学）)

资助基金：广西科技攻关项目桂科攻0537008-3A3,桂科攻0632002-1-2

在线出版日期：2010-11-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：12-16,32