南阳牛BoLA-DRA基因的克隆及其在大肠埃希菌中的表达

摘要：

为克隆南阳牛BoLA-DRA基因,构建原核表达载体并研究该基因在大肠埃希菌中的表达.从南阳牛脾脏组织中提取总RNA,利用RT-PCR方法扩增得到BoLA-DRA基因,将其克隆至pGEM-T easy克隆载体上,转化感受态细胞DH 5a,经测序鉴定后,进一步亚克隆至原核表达载体pGEX-4T-1中,构建出重组表达质粒,经IPTG诱导表达.结果表明,本试验成功克隆了大小为917 bp的BoLA-DRA基因,重组质粒pGEX-4T-DRA在大肠埃希菌中以包涵体形式表达,表达产物经SDS-PAGE和Western blot鉴定大小为54.4 ku,与预期结果一致.为进一步研究该蛋白的功能及制备抗体奠定了基础.

关键词：南阳牛、BoLA-DRA、pGEX-4T-1、原核表达

所属期刊栏目：31

分类号：Q785(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家十一五科技支撑计划项目2008BADB2B03-03;国家863计划项目2008AA101010

在线出版日期：2010-08-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：5-10