伪狂犬病病毒实时荧光PCR的建立和应用

摘要：

伪狂犬病是世界范围内严重影响养猪业发展的重要动物疫病,快速检测是有效防控该病的重要措施之一.为了建立该病的快速分子生物学检测方法,根据GenBank中登录的伪狂犬病病毒gD基因序列,选择高度保守区域设计引物和TaqMan 荧光探针,通过对实时荧光PCR反应条件进行优化,建立了用于检测伪狂犬病病毒的实时荧光PCR方法.特异性试验结果表明,该检测方法只能检测到目的病毒,表明其具有良好的特异性.灵敏性试验发现,其最低检测限可达1.42 pg/μL的总DNA,与PCR方法的灵敏度对比试验表明,其敏感度比PCR至少高10倍.对同一样品进行重复性检测,在组内及组间检测的荧光扩增曲线基本重叠,证实其重复性好.对180份临床样品进行伪狂犬病病毒核酸检测,结果发现有52份阳性样品.结果表明,所建立的实时荧光PCR方法可对伪狂犬病病毒进行准确、快速的检测,具有特异性好、灵敏度高、重复性好的优点,是开展伪狂犬病的临床检测和疫情监测工作的有力工具.

关键词：伪狂犬病病毒、实时荧光PCR、检测

所属期刊栏目：31

分类号：S852.659.1;S854.43(动物医学（兽医学）)

资助基金：检验检疫行业标准项目2007B008;深圳出入境检验检疫局科研项目SZK33-2005

在线出版日期：2010-07-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：21-25