猪圆环病毒2型ORF2-ORF1串联基因的原核表达及活性分析

摘要：

为探讨原核表达的PCV-2 ORF2-ORF1串联蛋白的抗原性及其作为基因工程亚单位疫苗的可能性,以构建好的PCV-2大庆分离株质粒pMD-18T/PCV-2为模板,PCR分别扩增去掉核定位信号的Cap蛋白基因(dNLS-ORF2)和Rep蛋白基因(ORF1),将其串联克隆到原核表达载体pET30a(+)上,经PCR、酶切和测序鉴定,成功构建了重组质粒pET30a-ORF2/ORF1.转化E.coli BL21(DE3)pLysS感受态细胞,经IPTG诱导后,进行SDS-PAGE电泳与Western blot分析.纯化的重组蛋白与PCV-2阳性血清发生特异性反应,并能与免疫小鼠的抗血清发生特异性反应.重组蛋白具有较好的免疫学活性,为基因工程亚单位疫苗的研制奠定了基础.

关键词：猪圆环病毒2型、ORF2、ORF1、表达

所属期刊栏目：31

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：黑龙江省农垦总局课题项目HNKXIV-08-07A;黑龙江八一农垦大学博士科研启动项目校启D-2007-1

在线出版日期：2010-04-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：41-44