PCV-2 ORF2基因的真核表达及其体内分布和安全性检测

摘要：

根据GenBank中猪圆环病毒2型(PCV-2)ORF2基因序列,设计了1对引物,应用PCR从广西PCV-2的DNA扩增出ORF2基因,将ORF2基因_克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)载体上,获得重组质粒,经PCR酶切以及序列分析鉴定,表明插入的片段为ORF2目的基因,插入的位置、大小和阅码框均正确,成功构建了真核表达载体重组质粒pcDNA-PCV-ORF2.对阳性真核表达质粒pcDNA-PCV-ORF2大量抽提后,以每只小鼠0.2 mg免疫5周龄左右的雌性小鼠,然后用ELISA检测免疫小鼠血清中抗体的产生情况,同时进行pcDNA-PCV-ORF2的体内分布和安全性检测.结果表明,pcDNA-PCV-ORF2在小鼠体内广泛存在,产生了抗猪圆环病毒的特异性抗体,从笫7天开始产生抗体,第28天抗体水平达到最高,抗体可维持7周以上,并具有良好的安全性.本研究通过对小鼠的免疫试验,产生了猪圆环病毒的特异性抗体,表明成功构建了能够在活体细胞中高效表达的真核表达栽体,为进一步研究猪圆环病毒DNA疫苗奠定了基础.

关键词：猪圆环病毒2型、ORF2基因、pcDNA3.1(+)、免疫保护

所属期刊栏目：29

分类号：S852.659.2;S858.28(动物医学（兽医学）)

资助基金：广西水产畜牧局项目桂渔牧科061909,国家百千万人才工程入选专项资金项目945200603

在线出版日期：2008-07-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：18-21