马的骨髓间充质干细胞诱导为软骨细胞和成骨细胞及其鉴定

摘要：

本研究旨在将建立的马(Equus caballus)骨髓间充质干细胞诱导分化为成骨细胞和软骨细胞.通过原代细胞培养获取马的骨髓间充质干细胞,并对第3代(P3)纯化细胞进行干细胞特性鉴定,之后诱导其向不同细胞分化并对诱导分化的细胞进行染色和特异性基因表达的鉴定.实验结果显示,获得的马骨髓细胞表达了干细胞转录因子和间充质干细胞表面标记物,确定获得的细胞为马骨髓间充质干细胞.P3代细胞经诱导培养后由长梭形转变为“骨结节”形态的成骨细胞和“铺路石”形态的软骨细胞.茜素红将诱导的成骨细胞团染成红色,并随着时间的递增红色“骨结节”逐步增大;阿尔新蓝则将蛋白聚糖和透明质酸等含量丰富的诱导细胞染为蓝色,并且随着诱导天数的增加被染成蓝色的软骨细胞逐渐增多,而对照组细胞未见着色.实时荧光定量PCR检测发现,成骨细胞中Col和ALPL基因的表达量随诱导时间的延长发生明显变化;普通PCR结果显示,在诱导的软骨细胞中扩增获得了collagenⅡ、aggrecan和Sox9软骨特异基因,而对照组细胞不表达特异基因.综上所述,本实验建立了马骨髓间充质干细胞并成功将其诱导分化为成骨细胞和软骨细胞,为骨组织缺损修复和软骨细胞的治疗提供了实验基础.

关键词：马、骨髓间充质干细胞、诱导分化、成骨细胞、软骨细胞

所属期刊栏目：55

分类号：Q952.4(动物学)

资助基金：国家自然科学基金项目No.31560621

在线出版日期：2020-07-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：353-362