奥利亚罗非鱼髓样分化因子(MyD88)的克隆及其在组织中的表达
髓样分化因子(myeloid differentiation factor 88,MyD88)是TLR(toll-like receptor)信号通路的关键接头蛋白,在先天性免疫中具有重要作用.通过RACE-RCR技术克隆了奥利亚罗非鱼(Oreochromisaureus) MyD88基因cDNA全长序列(GenBank登录号:JN032017).序列分析表明,奥利亚罗非鱼MyD88基因全长为1 611 bp,其中包括155 bp的5′非编码区,589 bp的3′非编码区和867 bp的编码区,编码288个氨基酸残基.MyD88蛋白N端具有死亡结构域,C端具有TIR结构域.同源性分析表明,奥利亚罗非鱼MyD88氨基酸序列与鳜鱼(Siniperca chuats)相似性最高,为85.8%,与其他鱼类相似性为70% ~82%,与哺乳动物相似性为63% ~ 66%;系统进化树分析表明,奥利亚罗非鱼MyD88与同属鲈形目的鳜鱼、大黄鱼(Larimichthys crocea)聚在一起.采用实时定量PCR方法检测MyD88在奥利亚罗非鱼各组织中的表达情况.结果显示,MyD88在所有被测组织中都有表达,其中表达量最高的是卵巢,其次在小肠、脾、肝、肾、鳃和血液中有较高的表达量,肌肉、精巢组织中表达量最低.本研究可为进一步探讨MyD88在奥利亚罗非鱼TLR信号通路中的作用奠定一定的基础.
奥利亚罗非鱼、实时定量PCR、MyD88、基因表达
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Q781(基因工程(遗传工程))
中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目2011JBFA04;现代农业产业技术体系建设专项资金项目CARS-49;现代农业人才支撑计划经费,中国水产科学研究院基本科研业务费专项资金项目2012A0508
2014-01-11(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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