10.3969/j.issn.1673-5358.2013.09.025
伪狂犬病病毒Guizhou-DY株gE基因主要抗原表位区原核表达及免疫原性研究
根据GenBank公布的伪狂犬病病毒GDSH株(EF552427)的gE基因序列设计1对特异引物,对伪狂犬病病毒 Guizhou-DY分离株的gE基因进行PCR扩增,将扩增产物克隆到pMD19-T载体上,构建重组质粒pMD19-T-gE636,经双酶切鉴定、核苷酸序列分析后,将gE基因主要抗原表位区亚克隆到pET-32a(+)原核表达载体上,成功构建原核表达质粒pET-32a(+)-gE636,并将其转化至BL21(DE3)中,诱导表达目的蛋白,表达产物经SDS-PAGE电泳、Western blot分析,得到了约42.7 ku的条带,与预期大小相符,进一步提取、纯化目的蛋白,将目的蛋白加入弗氏佐剂免疫小鼠,免疫后采血检测抗体,结果显示目的蛋白能诱导小鼠产生一定的抗体,该研究为伪狂犬病亚单位疫苗的研究奠定了基础。
伪狂犬病病毒、gE基因、原核表达、免疫原性
S85;R37
贵州省科学技术基金项目资助黔科合J字[2013]2110号;贵州省2011年农业攻关项目资助[黔科合NY字20113103号];贵州省2010年农业科技攻关项目黔科合NY字[2010]3042号
2013-10-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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