黄鳝Dmrt1基因5'端侧翼序列克隆和报告基因载体活性分析

摘要：

为深入研究黄鳝Dmrt1基因5'端侧翼序列在性别决定与分化中细胞通路之间的转录调控作用.本研究以黄鳝基因组DNA为模板,PCR扩增出Dmrt1基因5'端侧翼序列,并对该序列进行了生物信息学分析,然后将克隆获得的Dmrt1基因5'端侧翼序列构建到PGL3-enhancer载体中,命名为pGL3-enhancer-Dmrt1,最后将pGL3-enhan-cer-Dmrt1和内参质粒pRL-TK共转染至HEK293细胞,采用双荧光素酶检测系统对Dmrt1基因5'端侧翼的启动活性进行了检测.实验结果显示:克隆获得的Dmrt1基因5'端侧翼序列为1519 bp;利用TESS-Transcription Element Search System转录因子结合位点在线预测数据库对黄鳝Dmrt1基因5'端侧翼序列进行预测分析结果表明,该序列存在AP-1、Oct-1、C/EBPa和GATAx等真核生物通用的转录因子结合位点以及与性别相关基因的蛋白结合位点,如SRY、Sox3和Sox5等;双荧光素酶检测结果显示,该5'端侧翼序列具有启动活性.

关键词：黄鳝(Monopterus albus)、Dmrt1基因5’端侧翼启动子序列、克隆、报告基因、表达活性

所属期刊栏目：52

分类号：S917.4(水产基础科学)

资助基金：农业部科技教育司201003076

在线出版日期：2022-06-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：52-58