传染性胰坏死病毒双抗体夹心 ELISA检测方法的建立

摘要：

以纯化的兔抗传染性胰坏死病病毒（ IPNV） VP2重组蛋白多克隆抗体为包被抗体，抗IPNV VP2单克隆抗体为检测抗体建立了IPNV双抗体夹心ELISA方法。优化反应条件为：兔抗IPNV VP2重组蛋白多克隆抗体包被浓度为1.28μg/mL，抗IPNV VP2单克隆抗体的工作浓度为1.34μg/mL，酶标二抗稀释比例为1∶2000，以P/N＞2，且OD490 nm ＞0.101494作为阳性判定标准。该方法的重复性变异系数均小于10％，与传染性造血器官坏死病毒（IHNV）、病毒性出血败血症病毒（VHSV）、鲤春病毒血症病毒（SVCV）、轮状病毒（HRV）无交叉反应。对41份虹鳟肝脏样品分别进行双抗体夹心ELISA和RT-PCR检测，结果双抗体夹心法与RT-PCR法检测符合率为97％，表明本实验建立的双抗体夹心ELISA检测方法检测IPNV具有较高的敏感性和特异性，可用于IPNV的病原学检测。

关键词：传染性胰坏死病毒、双抗体夹心ELISA检测方法、单克隆抗体、兔抗血清

分类号：S941.41(水产保护学)

资助基金：国家支撑计划2013BAD12B02

在线出版日期：2014-08-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：57-62,72