微载体规模化培养草鱼细胞与病毒的工艺及优化

摘要：

研究了在悬浮培养系统中使用微载体Cephodex规模化培养草鱼肾脏组织细胞CIK和草鱼呼肠孤病毒(GCRV)的条件并进行了优化.结果表明,Cephodex是一种适合CIK细胞贴壁生长的微载体,搅拌方式(搅拌时间/静止时间)及血清浓度(0％、5％、10％、15％)对CIK细胞在Cephodex微载体上的贴附效率有影响.贴附期以转速35 r/min、每静置45 min搅拌2 min的间歇搅拌方式最佳,8h后细胞贴附率可达90％以上；细胞贴附期培养基中的血清浓度为5％.当Cephodex微载体用量10 mg/mL、细胞初始接种密度2.5×105 cells/mL、连续搅拌速度40 r/min时可获得最佳的细胞生长效能.用优化的最佳工艺条件大规模培养CIK细胞,接种感染复数为0.1的GCRV病毒3d后,培养细胞出现典型细胞病变效应,病毒滴度(lgTCID50/mL)为8.5.本项研究为草鱼出血病疫苗规模化制备技术研究奠定了基础.

关键词：草鱼肾脏组织细胞系(CIK)、草鱼呼肠孤病毒(GCRV)、微载体、大规模培养、工艺与优化

所属期刊栏目：43

分类号：S942.5(水产保护学)

资助基金：国家现代农业产业技术体系建设"大宗淡水鱼类产业技术体系"专项资金编号CARS-46-11

在线出版日期：2013-09-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：69-75