草鱼成熟脂肪细胞总RNA提取方法研究

摘要：

获得高质量的RNA是逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、Northern blot以及转录组测序(RNA-Seq)等分子生物学研究的基础,由于草鱼脂肪细胞中油脂含量较高,从中提取高质量RNA存在困难.本研究以草鱼(Ctenopharyngodon idellus)成熟脂肪细胞为材料,通过增加离心和抽提次数等方式对传统总RNA提取方法进行优化,采用琼脂糖凝胶电泳、核酸定量分析及基因扩增等方法验证所得RNA的完整性、纯度及质量.结果表明,经此方法提取的草鱼成熟脂肪细胞总RNA的A260nm/A280nm比值在1.95到2.00之间,28S和18S条带完整,草鱼LPL和β-actin基因扩增条带清晰.认为采用本方法获得的草鱼脂肪细胞RNA样品质量较高,能够用于后续分子生物学研究.

关键词：RNA提取、脂肪细胞、草鱼(Ctenopharyngodon idellus)

所属期刊栏目：43

分类号：S917.4(水产基础科学)

资助基金：国家自然科学基金项目31072223

在线出版日期：2013-03-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：74-77