尼罗罗非鱼β-actin基因启动子的分离及其在真核细胞中的活性验证

摘要：

采用高保真PCR方法从尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)基因组DNA中分离出β-actin基因启动子序列,将β-actin基因启动子插入pN1-EGFP构建成真核细胞表达载体pEGFP-β-actin,并通过脂质体转染法将重组载体导入人胚肾上皮细胞HEK 293T,荧光显微镜下观察外源基因EGFP在细胞中的表达情况.结果显示:β-actin基因启动子调控区具有典型的启动子特征,含有TATA Box、CArG和CCAAT Box 3个重要的顺式作用元件.荧光显微镜下观察到50%～60%的HEK 293T细胞中发出绿色荧光,显示尼罗罗非鱼β-actin基因启动子能够驱动EGFP的转录和表达,具有较好的活性,为构建"全鱼"转基因罗非鱼的研究奠定基础.

关键词：尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)、β-肌动蛋白、启动子、绿色荧光蛋白、转染

所属期刊栏目：41

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家科技支撑计划专题2006BAB01A1202;2007年公益性行业农业科研专项3-49;现代农业产业技术体系建设专项资金nycytx-48;国家重点基础研究发展计划973计划项目2004CB117401

在线出版日期：2011-05-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：78-82