β-防御素-2荧光素酶报告基因载体及克罗恩突变体的构建

摘要：

目的:构建人β-防御素-2(hBD-2)荧光素酶报告基因质粒及其克罗恩病(Crohn's,CD)相关突变体,并检测其在人胚胎肾T细胞(HEK-293T)中的活化.方法:通过基因重组构建包含hBD-2启动子序列的报告基因质粒hBD-2-780-luc,再通过定点突变技术在启动子区(-233位点)引入变异点(G变为C),构建突变体hBD-2-rout-he;经酶切及测序验证后,将报告基因质粒和野生型NOD2/CARD15蛋白真核表达载体共转染到HEK-293T中,TNF-α刺激后测定双荧光素酶的表达.结果:酶切和测序证实,构建了重组体hBD-2-780-luc及其突变体hBD-2-mut-luc,两者均能表达荧光素酶活性,且明显高于空载体.结论:hBD-2报告基因质粒hBD-2-780-luc及其CD相关突变体hBD-2-mut-luc构建成功,并在细胞内活化-表达荧光素酶.

关键词：β-防御素2、克罗恩病、荧光素酶报告基因质粒、定点突变

所属期刊栏目：30

分类号：R574.5(消化系及腹部疾病)

资助基金：广东省自然科学基金03004770

在线出版日期：2009-12-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：2077-2080