MyD88基因真核表达载体的构建及表达

摘要：

目的:构建人髓样分化因子88(MyD88)基因编码区序列(cDNA)的真核表达载体,观察其在GES-1细胞中的表达. 方法:从健康人外周血单个核细胞中提取总RNA,应用RT-PCR方法扩增MyD88基因cDNA全长序列,经NheI和KpnI酶切位点,插入到pcDNA3.1/myc-His(-)A质粒中,构建成MyD88基因的真核表达载体;用脂质体Lipo-fectamine2000将其转染人人胃黏膜细胞株GES-1细胞中,Western Blot检测其在GES-1细胞中的表达. 结果:重组载体经酶切鉴定和测序证实目的基因正确无误;Western Blot结果显示MyD88基因在GES-1细胞具有良好的表达. 结论:成功构建了pcDNA3.1/mye-His(-)A-MyD88真核表达载体,并在GES-1细胞中进行了表达,为进一步研究MyD88的结构和功能奠定了基础.

关键词：人髓样分化因子88、逆转录-PCR、基因克隆、基因转染、蛋白质印迹技术

所属期刊栏目：30

分类号：Q556(酶)

资助基金：南京军区医药卫生科研基金08MA100;南京军区福州总医院留学归国人员专项基金2004037

在线出版日期：2009-11-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1655-1658