负载hTERT复制缺陷型腺病毒的包装及鉴定

摘要：

目的: 构建负载人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的复制缺陷型腺病毒.方法: 将克隆有正义hTERT cDNA的腺病毒穿梭质粒pDC315-hTERT与腺病毒包装质粒pBHGloxDeltaE1,3Cre共转染人胚肾293细胞(HEK 293), 包装负载hTERT基因的复制缺陷型腺病毒表达载体(Ad-hTERT). 对Ad-hTERT扩增、纯化并浓缩后,进一步行感染性鉴定、电镜鉴定及双引物PCR鉴定. 结果: 纯化浓缩后的Ad-hTERT滴度可达5×1012 pfu/L. 电镜下可见在HEK 293细胞中形成的病毒颗粒,PCR双引物鉴定Ad-hTERT可扩增出Ad及hTERT特异片段,而对照则不能扩出hTERT片段. 结论: 成功构建了负载hTERT基因的复制缺陷型腺病毒.

关键词：人端粒酶逆转录酶、腺病毒表达载体

所属期刊栏目：27

分类号：Q756;Q753(分子遗传学)

资助基金：中国科学院资助项目30470797

在线出版日期：2006-03-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：53-56