Restin基因启动子的克隆及其在HeLa细胞中的转录活性

摘要：

目的:扩增细胞静息因子(restin)基因启动子并构建该启动子的荧光报告系统,探讨其对全反式维甲酸(all-trans retinoic acid, ATRA)刺激的反应. 方法:①对restin基因上游约2000 bp基因组序列进行计算机生物信息学分析. ②利用PCR技术扩增restin基因上游序列,将其克隆入pG5-luc中,插入荧光素酶报告基因上游,取代5个GAL-4结合位点及腺病毒启动子,构建Rp-luc质粒. ③将构建的质粒转染入HeLa细胞,ATRA诱导检测该质粒中荧光素酶的表达. 结果:酶切及测序结果均证实成功克隆了restin基因上游序列,已将该序列插入到荧光素酶基因的上游;ATRA诱导转入HeLa细胞中的真核表达载体Rp-luc,荧光素酶表达明显增加. 结论:成功构建了含有restin基因启动子序列的荧光报告系统,为进一步研究restin基因功能及其转录调控奠定了基础.

关键词：restin、转录调控、启动子、全反式维甲酸

所属期刊栏目：27

分类号：Q784(基因工程（遗传工程）)

资助基金：中国科学院资助项目30271457;30470874

在线出版日期：2006-03-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：46-48