DOX-GA3对βG转染人肾癌GRC-1细胞的体外杀伤作用

摘要：

目的: 建立高表达β-葡萄糖醛酸苷酶(βG)基因的肾癌模型,并观察βG前体药葡萄糖醛酸化阿霉素(DOX-GA3)对βG转染人肾癌GRC-1细胞的体外杀伤作用. 方法: 利用阳离子脂质体将已构建的真核表达载体pcDNA3.1(+)转入肾癌细胞株GRC-1,用基因组PCR扩增,免疫荧光,免疫组化检测鉴定其转录和表达水平,分别用MTT及细胞计数法检测βG阳性细胞对DOX-GA3的体外敏感性和旁观者效应. 结果: 经G418筛选后的阳性细胞克隆,在DNA和蛋白水平证实了转染细胞内有βG基因高表达,100 μmol/L DOX-GA3作用于亲本细胞3 d,生存率为82%,但可杀死全部转染细胞,IC50GRC-1/βG为1.24 μmol/L,而IC50GRC-1为100 μmol/L以上,将转染细胞和亲本细胞以不同比例混合时,转染细胞占20%,有80%的细胞被杀死. 结论: 建立了稳定的βG基因高表达的肾癌模型. DOX-GA3对转染细胞有明显的杀伤作用,随时间延长和剂量增加作用增强,并显示较强的旁观者效应.

关键词：β-葡萄糖醛酸苷酶、肾癌细胞、转染、自杀基因治疗、药物前体、旁观者效应

所属期刊栏目：26

分类号：R737(肿瘤学)

资助基金：中国科学院资助项目30300413

在线出版日期：2006-02-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：2212-2215