人β-防御素-3基因定点突变,原核表达载体构建和融合蛋白表达

摘要：

目的:利用PCR技术对人β-防御素-3基因进行定点突变,将突变后的基因连接入pGEX-4T-1表达载体.方法:采用PCR体外定点突变技术,设计两对引物,引入一个突变点,通过重叠延伸法进行两次PCR扩增,使人β-防御素-3基因第27位密码子由GAG突变为CGA,将突变后的片段克隆入pGEX-4T-1质粒中,转化至E.coli BL21,对鉴定含有目的片段的克隆进行测序.结果:获得预期大小的突变产物,经序列鉴定证实为突变的人β-防御素-3基因. 将诱导后的菌体进行SDS-PAGE电泳,在Mr31 000处可见明显的高表达带.结论:获得突变型人β-防御素-3基因,构建了表达载体,融合蛋白得到表达,为基因工程制备肽类抗生素奠定了基础.

关键词：人β-防御素-3、定点突变、基因表达、抗生素类、肽

所属期刊栏目：26

分类号：R516(传染病)

资助基金：甘肃省自然科学基金3ZS041-A25-055

在线出版日期：2005-11-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1638-1641