10.3321/j.issn:1000-2790.2002.03.015
汉滩病毒核蛋白羧基端多肽真核表达载体的构建及其表达产物的鉴定
目的探讨汉滩病毒(HTNV)核蛋白羧基端多肽的抗原性,为建立分型检测方法奠定基础.方法设计并合成S基因编码区及其3端825 bp片段引物,用PCR方法从PBV220-S22原核质粒中扩增出目的片段,应用TA克隆将其插入pcDNA3.1/V5-His-TOPO载体中,并通过脂质体转染至Vero细胞中进行瞬时表达,表达产物用间接免疫荧光法进行鉴定.结果成功构建了pcDNA3.1-S及pcDNA3.1-S-C真核表达载体,间接免疫荧光法可检测到真核表达质粒转染的Vero细胞表达的核蛋白羧基端多肽.结论 pcDNA3.1-S及pcDNA3.1-S-C真核表达载体有较高的转染效率,能在宿主细胞中表达,为制备分型用核蛋白多肽抗原打下了基础.
汉滩病毒、核衣壳蛋白、多肽抗原、真核表达
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R365.51(病理学)
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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